banner_nika_hozyaike      banner_pos_bekker     banner_specpredl_roznica_2

Изменения трансэпидермальной потери воды и гидратации кожи по данным экспрессии аквапорина-3 при псориазе

  1. Янг Ли
  2. Юнг-Джин Дже
  3. Санг-Син Ли
  4. Чжэн Цзюнь Ли
  5. Dae-Kyoung Choi
  6. Ю бин Квон
  7. Кьюнг-Чхоль Сон
  8. Мен Им
  9. Молодой Джун Сео
  10. Чон Хун Ли
  11. Аннотация
  12. Задача
  13. методы
  14. Результаты
  15. Заключение
  16. ВСТУПЛЕНИЕ
  17. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
  18. Культура клеток
  19. Вестерн-блот анализ
  20. Иммунофлуоресцентное окрашивание
  21. Анализ поглощения глицерина
  22. TEWL и оценка увлажнения кожи
  23. статистический анализ
  24. РЕЗУЛЬТАТЫ
  25. Поглощение глицерина в кальциевых дифференцированных кератиноцитах человека
  26. Экспрессия AQP3 в коже псориаза
  27. TEWL и гидратация кожи у пациентов с псориазом и контрольной группой
  28. Таблица 1
  29. ОБСУЖДЕНИЕ
  30. ПОДТВЕРЖДЕНИЕ
  31. Рекомендации

Ann Dermatol. 2012 май; 24 (2): 168–174.

, MD, MS, MD, MS, Ph.D., MS, Ph.D., MD, MD, и, MD , MD, MS, MD, MS, Ph

Янг Ли

Кафедра дерматологии, Медицинский колледж, Национальный университет Чунгнам, Тэджон, Корея.

Юнг-Джин Дже

Кафедра дерматологии, Медицинский колледж, Национальный университет Чунгнам, Тэджон, Корея.

Санг-Син Ли

Кафедра дерматологии, Медицинский колледж, Национальный университет Чунгнам, Тэджон, Корея.

Чжэн Цзюнь Ли

Кафедра дерматологии, Медицинский колледж, Национальный университет Чунгнам, Тэджон, Корея.

Dae-Kyoung Choi

Кафедра дерматологии, Медицинский колледж, Национальный университет Чунгнам, Тэджон, Корея.

Ю бин Квон

Кафедра дерматологии, Медицинский колледж, Национальный университет Чунгнам, Тэджон, Корея.

Кьюнг-Чхоль Сон

Кафедра дерматологии, Медицинский колледж, Национальный университет Чунгнам, Тэджон, Корея.

Мен Им

Кафедра дерматологии, Медицинский колледж, Национальный университет Чунгнам, Тэджон, Корея.

Молодой Джун Сео

Кафедра дерматологии, Медицинский колледж, Национальный университет Чунгнам, Тэджон, Корея.

Чон Хун Ли

Кафедра дерматологии, Медицинский колледж, Национальный университет Чунгнам, Тэджон, Корея.

Кафедра дерматологии, Медицинский колледж, Национальный университет Чунгнам, Тэджон, Корея.

Автор-корреспондент: Чон Хун Ли, доктор медицинских наук, факультет дерматологии, Медицинский колледж, Национальный университет Чунгнам, 33 Munhwa-ro, Тэджон 301-747, Корея. Тел: 82-42-280-7707, факс: 82-42-280-5098, [email protected]

Поступило в 2011 г. 12 июля; Редакция 2011 г., июль 29; Принято в 2011 году 8 августа.

Это статья открытого доступа, распространяемая в соответствии с условиями некоммерческой лицензии Creative Commons Attribution ( http://creativecommons.org/licenses/by-nc/3.0 ) который разрешает неограниченное некоммерческое использование, распространение и воспроизведение на любом носителе, при условии, что оригинальная работа должным образом процитирована. Эта статья была цитируется другие статьи в PMC.

Аннотация

Фон

Аквапорины (AQP) представляют собой семейство белков, транспортирующих воду, присутствующих во многих типах эпителиальных и эндотелиальных клеток млекопитающих. Известно, что среди AQP AQP3 является переносчиком воды / глицерина, экспрессируемым в коже человека.

Задача

Была исследована взаимосвязь между уровнем экспрессии AQP3 и транспидермальной потерей воды (TEWL) в пораженной псориазом и поврежденной кожей у пациентов с псориазом и гидратацией кожи на пораженной и перилазальной коже больных псориазом.

методы

Экспрессию AQP3 в пораженной псориазом и здоровой контрольной коже определяли с использованием иммуногистохимического и иммунофлуоресцентного окрашивания. TEWL и гидратацию кожи измеряли с использованием Tewameter® TM210 (Courage & Khazaka, Кельн, Германия) и Corneometer® CM 820 (Courage & Khazaka) соответственно.

Результаты

AQP3 экспрессировался главным образом в плазматической мембране рогового слоя и спинномозгового слоя в нормальном эпидермисе. В отличие от нормального эпидермиса, AQP3 показал пониженную экспрессию в поврежденном и пери-пораженном эпидермисе псориаза. TEWL был увеличен, а гидратация кожи уменьшена в пораженной и перилазионной коже пациентов с псориазом по сравнению со здоровым контрольным образцом.

Заключение

Несмотря на то, что различные факторы способствуют снижению гидратации кожи в пораженной псориазом коже и поражении кожи, AQP3, по-видимому, является ключевым фактором обезвоживания кожи кожи, пораженной псориазом.

Ключевые слова: аквапорин 3, обезвоживание, псориаз, потеря воды

ВСТУПЛЕНИЕ

Псориаз - это хроническое заболевание кожи, характеризующееся эритематозными бляшками с толстыми чешуйками. Пациенты с псориазом обычно жалуются на сухость кожи. Предотвращение сухости кожи при правильном использовании смягчающих средств помогает продлить интервалы без терапии и помогает в предотвращении раннего рецидива 1 , 2 , Хотя существует много исследований относительно механизмов, влияющих на сухость кожи при атопическом дерматите, мало исследований, касающихся конкретно псориаза.

Аквапорины (AQP) представляют собой белки, которые облегчают поступление воды в клетки, и в настоящее время у млекопитающих было идентифицировано 13 членов семейства. В отличие от других AQP, AQP3 экспрессируется в эпителиальных тканях и работает как канал вода / глицерин 3 , Функциональная роль AQP3 в эпидермисе человека является областью современных научных исследований, так как AQP3 широко экспрессируется в базальном и остистом слоях эпидермиса.

Недавние исследования показали, что AQP3 участвует не только в транспорте и гидратации воды в эпидермисе человека, но также в регуляции пролиферации кератиноцитов, миграции клеток и онкогенеза. 4 , 5 , Современные исследования AQP3, связанные с атопическим дерматитом, фокусируются на сухости кожи. Однако мало известно об экспрессии AQP3 в отношении гидратации кожи и трансэпидермальной потери воды (TEWL) при псориатических поражениях кожи по сравнению со здоровой кожей.

Целью данного исследования было определить экспрессию AQP3 в эпидермисе псориаза и изучить взаимосвязь между экспрессией AQP3 и гидратацией кожи при псориазе.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Человеческие субъекты

В общей сложности 5 пациентов с псориазом и 5 здоровых добровольцев участвовали в этом исследовании для иммуногистохимического и иммунофлуоресцентного окрашивания. В общей сложности 19 пациентов с псориазом и 10 здоровых добровольцев участвовали в измерении TEWL и гидратации кожи. Ни один из пациентов не получал фототерапию или местное лечение в течение предыдущего года. Все образцы кожи были получены с письменного информированного согласия доноров, и исследование было одобрено в соответствии с процессом одобрения комитета по этике Государственной университетской больницы Чунгнам.

Культура клеток

Нормальные эпидермальные кератиноциты человека культивировали, как сообщалось ранее. 6 , Кератиноциты выращивали в среде без кератиноцитов и сыворотки с добавлением экстракта бычьего гипофиза и рекомбинантного эпидермального фактора роста человека (Invitrogen, Grand Island, NY, USA).

Вестерн-блот анализ

Клетки лизировали в растворе Proprep (Интрон). Содержание общего белка измеряли с использованием набора для анализа белка Брэдфорда (Bio-Rad Laboratories, Hercules, CA, USA). Образцы обрабатывали на додецилсульфат-полиакриламидном геле натрия, переносили на нитроцеллюлозные мембраны и инкубировали с соответствующими антителами. Затем блоты инкубировали с вторичными антителами, конъюгированными с пероксидазой, и визуализировали с использованием усиленной хемилюминесценции (интрон). В этом исследовании были использованы следующие первичные антитела: AQP3, AQP9, филагрин, инволюкрин (Santa Cruz Biotechnologies, Santa Cruz, CA, USA) и актин (Sigma, St. Louis, MO, USA).

Иммунофлуоресцентное окрашивание

Образцы были погружены в парафин. Срезы образцов депарафинизировали, регидратировали и трижды промывали в фосфатно-солевом буфере (PBS). После обработки протеиназой К (1 мг / мл) в течение 5 минут при 37 ° С срезы обрабатывали H2O2 в течение 10 минут при комнатной температуре, блокировали 0,1% Твин-20 и 1% бычьим сывороточным альбумином в PBS в течение 20 минут, и позволяли реагировать с соответствующими первичными антителами в течение 4 часов. Срезы инкубировали последовательно со вторичным антителом (анти-мышиный IgG-TR, Santa Cruz Biotechnologies) и наблюдали и визуализировали при флуоресцентной микроскопии (Olympus IX71). Интенсивность флуоресценции анализировали с использованием анализатора изображений (i-solution TM, iMTechnology, Bucheon, Korea).

Анализ поглощения глицерина

Нормальные эпидермальные кератиноциты человека культивировали в бессывороточной среде кератиноцитов до слияния до 80%, затем голодали в базисной среде кератиноцитов (KBM) в течение 1 дня. Затем клетки инкубировали в KBM, содержащей 1 мкКи / мл [3H] глицерина с 1,2 мМ Ca2 + и без него, в течение 0 минут, 10 минут, 30 минут, 60 минут, 4 часов, 12 часов, 24 часов и 48 часов. Реакции останавливали, дважды промывая ледяным PBS. Затем клетки растворяли в 1 н. NaOH, и аликвоты этого экстракта подвергали жидкостному сцинтилляционному счету. Подсчеты, полученные из дублированных выборок в каждый момент времени для двух условий, были усреднены и построены на графике, и для каждого условия было определено линейное уравнение. Полученные коэффициенты корреляции обычно составляли 0,99 или более. Наклоны, определенные из нескольких экспериментов, были усреднены и проанализированы статистически для значительных различий между условиями 7 ,

TEWL и оценка увлажнения кожи

Чтобы определить уровень влажности поверхности кожи, мы провели измерения TEWL и увлажнения кожи. Результаты использовались для предоставления информации о состоянии барьера проницаемости в нормальных, экспериментально возмущенных и болезненных условиях. Были опубликованы рекомендации по измерению TEWL и увлажненности кожи. Состояние всех субъектов сначала стабилизировалось в течение 15-20 минут в помещении с контролируемой климатом и влажностью. Температура окружающей среды колебалась от 21 24 до 24 ℃, со средней относительной влажностью в диапазоне 39 ~ 50%. Две бляшки на руке были отобраны для исследования пораженной псориатической кожей кожи, а нормальная кожа вокруг псориатических бляшек была выбрана как перилиальная псориатическая кожа. Ни один из отобранных пациентов с псориазом не получал фототерапию и местное лечение, по крайней мере, в прошлом году. Значение TEWL измеряли с использованием Tewameter® TM 210 (Courage & Khazaka, Кельн, Германия), а гидратацию кожи измеряли с использованием Corneometer® CM 820 (Courage & Khazaka). 8 , 9 ,

статистический анализ

Статистический анализ был выполнен с использованием SPSS ver.12.0 (SPSS Inc., Чикаго, Иллинойс, США) для Windows. Результаты представлены как ± среднее стандартное отклонение. Все эксперименты повторяли не менее трех раз с документированной воспроизводимостью. Данные анализировали на статистическую значимость, используя независимый t-критерий и повторные измерения ANOVA. Значения p <0,05 считались значимыми.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Экспрессия AQP3 в нормальном эпидермисе человека

Чтобы проверить экспрессию белка AQP3 в нормальном эпидермисе человека, мы провели иммунофлуоресцентное окрашивание антителом против AQP3. демонстрирует высокую экспрессию человеческого эпидермального белка AQP3, расположенного в плазматической мембране кератиноцитов базального слоя и спинозного слоя. AQP3 был слабо обнаружен в гранулах и роговом слое.

AQP3 был слабо обнаружен в гранулах и роговом слое

(A) Иммунолокализация аквапоринов 3 (AQP3) с использованием иммуногистохимии в эпидермисе человека. AQP3 экспрессируется в базальном слое и спинномозговом слое. (B) Экспрессия AQP3 в индуцированной кальцием дифференцировке кератиноцитов. AQP3 из культивируемых экстрактов кератиноцитов в количестве 20 или 30 мкг наносили на электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия и определяли с использованием пептидного поликлонального антитела против AQP3. Инволюкрин и филагрин использовали в качестве контрольных факторов для дифференцировки. (C) Способность [3H] глицерина к дифференцированным кальцием кератиноцитам человека. Приблизительно слитые кератиноциты инкубировали в кератиноцитной базальной среде, содержащей 1 мкКи / мл [3H] глицерина с 1,2 мМ Ca2 + и без него, в течение 0 минут, 10 минут, 30 минут, 60 минут, 4 часов, 12 часов, 24 часов и 48 часов. ч. NHEK: нормальный эпидермальный кератиноцит человека, CPM: подсчет в минуту.

Чтобы подтвердить уровень экспрессии белка AQP3 в эпидермисе, мы провели иммунный блот-анализ для дифференцировки кератиноцитов, вызванной кальцием. Иммунный блот-анализ показал, что белок AQP3 экспрессировался на эндогенном уровне в нормальных эпидермальных кератиноцитах с постепенным снижением через 3 дня. Эти результаты аналогичны результатам иммунофлуоресцентного окрашивания ().

Иммунореактивность аквапоринов 3 (AQP3) в (А) здоровом контроле, (В) псориатической пораженной и (С) периферической коже. Экспрессия белка AQP3 снижена и неправильно локализована в коже поражения и перилазии, демонстрируя диффузную цитоплазматическую картину. (D) Интенсивность окрашивания AQP3 между здоровым контролем и псориазом. Интенсивность флуоресценции анализировали с использованием анализатора изображений (i-solution TM, iMTechnology, Bucheon, Korea) * p <0,05 по сравнению со здоровым контролем.

Поглощение глицерина в кальциевых дифференцированных кератиноцитах человека

Поскольку известно, что AQP3 участвует в транспорте вода / глицерин в эпидермисе, поглощение глицерина в дифференцированных кальцием кератиноцитах измеряли с использованием радиоактивно меченного [3H] глицерина в течение 48 часов. показывает постепенное увеличение поглощения [3H] глицерина в дифференцированных кальцием кератиноцитах и ​​значительное снижение поглощения глицерина через 48 часов. Поглощение [3H] глицерина отражает результаты иммунофлуоресцентного анализа AQP3 и анализа иммуноблоттинга, которые указывают на экспрессию AQP3 в основном в мальпигиевом слое. Результаты поглощения глицерина иллюстрируют функциональную способность AQP3, которая выражается только во время ранней дифференцировки кератиноцитов. Эти результаты согласуются с расположением AQP3 в эпидермисе.

Экспрессия AQP3 в коже псориаза

Чтобы идентифицировать экспрессию белка AQP3 в эпидермисе псориатической кожи, мы провели иммунофлуоресцентное окрашивание антителом против AQP3. демонстрирует пониженную экспрессию AQP3 в псориатической и поврежденной коже по сравнению со здоровым контролем. Модели иммунореактивности AQP3 были различными у здоровых пациентов с контролем и псориазом. Эпидермис у здоровых контрольных пациентов показал иммунореактивность AQP3, локализованную в основном в плазматической мембране мальпигиевого слоя, в то время как псориатический поврежденный и перилизальный эпидермис продемонстрировал диффузную иммунореактивность, локализованную в цитоплазме, а не в плазматической мембране.

TEWL и гидратация кожи у пациентов с псориазом и контрольной группой

Для сравнения уровней TEWL и гидратации кожи между больными псориазом (PA) и контрольными пациентами измерения проводили не менее 5 раз на каждом участке. Измерения проводились в помещении, в диапазоне температур 21 ~ 24 ℃ и относительной влажности 39 ~ 50%. Псориатические поражения кожи были разделены на 3 группы: псориаз пораженный, псориаз перилазальный и нормальный кожный псориаз.

показывает сравнение между ПА и контрольными пациентами. Кожа как псориатического поражения, так и перилазии поражения имела пониженную гидратацию кожи и повышенные уровни TEWL по сравнению со здоровой контрольной кожей. Уровни гидратации кожи и TEWL в нормальной непсориатической коже у пациентов с псориазом не отличались от контрольной группы. показывает гидратацию кожи и значения TEWL у пациентов с псориазом, разделенных на три группы. Поражения псориазом показали статистически значимое снижение гидратации кожи и повышение уровня TEWL по сравнению с периплазматической и нормальной непсориатической кожей ( р <0,05). Псориатическая пери-пораженная кожа также показала статистически значимое снижение гидратации кожи и повышение уровня TEWL по сравнению с нормальной непсориатической кожей; это говорит о дефекте влажности кожи при перилазальном псориазе, даже когда кожа выглядит нормальной ( р <0,05).

(A) Различия в гидратации кожи среди псориатической поврежденной, перилазионной и нормальной непсориатической кожи у пациентов с псориазом. Увлажнение кожи измеряли с использованием Corneometer® CM 820 (Courage & Khazaka, Кельн, Германия). (B) Различия в транспидермальной потере воды (TEWL) среди псориатической пораженной, перилазальной и нормальной кожи без псориаза у пациентов с псориазом. TEWL измеряли с использованием Tewameter® TM 210 (Courage & Khazaka).

Таблица 1

Сравнение гидратации кожи и TEWL между больными псориазом и здоровыми контролями

Сравнение гидратации кожи и TEWL между больными псориазом и здоровыми контролями

ОБСУЖДЕНИЕ

Пациенты с псориазом страдают не только от эритематозных чешуйчатых бляшек на теле, но и от зуда и сухости кожи. Хотя было проведено много исследований, посвященных изучению механизма гиперпролиферации эпидермиса и активации иммунных клеток при псориазе, лишь немногие исследуют потенциальные причины, по которым поражения кожи, связанные с псориазом, настолько сухие. 10 ,

После идентификации AQP1 в 1993 году у млекопитающих было идентифицировано 11 дополнительных AQP. AQP были описаны в эпителиальных клетках кожи, почек, желудочно-кишечного тракта и дыхательных путей. Точная функция AQP в коже изучена менее тщательно, чем в других органах, но в последнее время AQP привлекли внимание, потому что AQP3 широко экспрессируется в коже.

Функциональная роль AQP3 в коже была недавно продемонстрирована наблюдаемым фенотипом у мышей, нокаутированных по AQP3, которые показали пониженное содержание глицерина, способность удерживать воду в эпидермисе, сниженную эластичность кожи и замедленное заживление ран. 11 , 12 , Более того, недавнее исследование показало снижение экспрессии AQP3 в стареющей коже, что позволяет предположить, что AQP3 участвует в естественном старении кожи человека, не подвергшейся воздействию солнца. 13 ,

Экспрессия AQP3 в эпидермисе локализуется в плазматической мембране кератиноцитов в базальном слое и спинномозговом слое. Возникает вопрос о том, как AQP3 может функционировать при гидратации рогового слоя и TEWL, когда он в основном расположен на дне эпидермиса. Это объясняется фенотипическим анализом AQP3-дефицитных мышей. В исследовании высокая влажность и окклюзия увеличивали гидратацию рогового слоя у дикого типа, но не у AQP3 нулевых мышей. Значения проводимости кожи у мышей дикого типа и у нулевых мышей AQP3 были одинаковыми после воздействия 10% влажности, что указывает на то, что транспорт воды через AQP3 не является фактором, ограничивающим скорость в TEWL. 10 , 11 , Как проницаемость для воды, так и для глицерина были значительно снижены в эпидермисе мышей, нокаутированных по AQP3, с нормальной концентрацией глицерина в дерме и сыворотке. Результаты показывают, что в отсутствие AQP3, который расположен в мальпигиевом слое эпидермиса, снижается транспорт глицерина из крови в эпидермис, и что транспорт глицерина, а не воды, ответственен за гидратацию рогового слоя и TEWL, так как глицерин является естественным увлажняющим фактором 14 ,

Паттерны иммунореактивности белка AQP3 различны в псориатической и поврежденной коже по сравнению со здоровой контрольной кожей. Мало того, что иммунореактивность AQP3 заметно уменьшилась в коже псориаза при повреждении и пери-поражении, но белок AQP3 диффузно экспрессируется в цитоплазме, а не в плазматической мембране, как в контрольной группе. 15 , AQP3 в коже, пораженной псориазом и пери-поражением, вероятно, не может функционировать должным образом, потому что количество белка AQP3 снижено; AQP3 также функционально нарушен из-за ненормальной локализации в кератиноцитах. Измерение гидратации кожи и TEWL у пациентов с псориазом и контрольной группой показало актуальность результатов in vitro, свидетельствующих о снижении экспрессии белка AQP3 в коже с псориазом при повреждениях и перилазии, что приводит к снижению гидратации кожи и увеличению TEWL. Причина снижения экспрессии белка AQP3 при псориазе неизвестна. Однако существуют исследования, указывающие, что передача сигналов фактора некроза опухоли (TNF) -α и TNF-рецептора-1 снижает экспрессию белка AQP3 в некоторых клетках. 16 , 17 , Псориаз является Th1-цитокин-доминантным заболеванием кожи, и продукция TNF-α увеличивается в кератиноцитах и ​​инфильтрированных иммунных клетках. Это может быть связано со снижением экспрессии белка AQP3 при псориазе. Известно, что ретиноевая кислота, которую мы применяем перорально и местно при лечении ПА кожи, увеличивает экспрессию AQP3 в нормальной коже человека. 18 , Все транс-ретиноевая кислота увеличивала экспрессию мРНК и белка AQP3 в нормальных эпидермальных кератиноцитах человека, что указывает на то, что ретиноевая кислота увеличивает экспрессию AQP3 и повышает биологическую активность в коже человека. Мы можем предположить, что использование ретиноевой кислоты при псориазе может увеличить экспрессию AQP3 в псориазном эпидермисе, а AQP3 может играть функциональную роль в улучшении поражений псориазом, регулируя пролиферацию и дифференцировку кератиноцитов при псориазе.

Таким образом, AQP3 является преобладающим AQP в человеческом эпидермисе, и сниженная экспрессия AQP3 была выявлена ​​при биопсии кожи с поврежденной и пери-пораженной псориатической кожи по сравнению со здоровым контролем. Измерение гидратации кожи и TEWL показало снижение гидратации кожи и увеличение TEWL в коже с псориазом при повреждениях и пери-поражениях по сравнению со здоровым контролем, что указывает на актуальность и значимость ассоциации с экспрессией AQP3 в эпидермисе. Поскольку AQP3 действует как переносчик воды / глицерина в коже, AQP3 может быть ключевым фактором, влияющим на снижение гидратации кожи и увеличение TEWL в псориатической коже.

ПОДТВЕРЖДЕНИЕ

Это исследование было финансово поддержано исследовательским фондом Национального университета Чунгнам в 2008 году.

Рекомендации

1. Гуджонссон JE, старейшина ST. Псориаз. В кн .: Вольф К., Голдсмит Л.А., Кац С.И., Гилхрест Б.А., Паллер А.С., Леффелл DJ, редакторы. Дерматология Фитцпатрика в общей медицине. 7-е изд. Нью-Йорк: Макгроу-Хилл; 2008. С. 169–193. [ Google ученый ] 2. Хара-Чикума М, Веркман А.С. Роли аквапорина-3 в эпидермисе. J Инвест Дерматол. 2008; 128: 2145–2151. [ PubMed ] [ Google ученый ] 3. Лоден М. Клиническое преимущество увлажнителей. J Eur Acad Dermatol Venereol. 2005; 19: 672–688. [ PubMed ] [ Google ученый ] 4. Хара-Чикума М, Веркман А.С. Аквапорин-3 облегчает миграцию и пролиферацию эпидермальных клеток во время заживления ран. J Mol Med (Berl) 2008; 86: 221–231. [ PubMed ] [ Google ученый ] 5. Хара-Чикума М, Веркман А.С. Профилактика онкогенеза кожи и нарушения пролиферации эпидермальных клеток путем целенаправленного разрушения гена аквапорина-3. Mol Cell Biol. 2008; 28: 326–332. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ Google ученый ] 6. Юн Х.К., Сон К.С., Ли Дж.С., Ким Ю.Дж., Бхак Дж., Ян Дж.М. и др. Прогнозирование и оценка межбелкового взаимодействия в дифференцировке кератиноцитов. Biochem Biophys Res Commun. 2008; 377: 662–667. [ PubMed ] [ Google ученый ] 7. Zheng X, Bollinger Bollag W. Аквапорин 3 колокатируется с фосфолипазой d2 в богатых кавеолином мембранных микродоменах и подавляется при дифференцировке кератиноцитов. J Инвест Дерматол. 2003; 121: 1487–1495. [ PubMed ] [ Google ученый ] 8. Чо ШХ, Сео С.Дж., Хонг СК. Экспрессия антимикробных пептидов в соответствии с изменениями уровней трансэпидермальной потери воды у пациентов с атопическими дерматитами. Ann Dermatol. 2007; 19: 47–54. [ Google ученый ] 9. Генрих U, Koop U, Leneveu-Duchemin MC, Osterrieder K, Bielfeldt S, Chkarnat C, et al. Многоцентровое сравнение гидратации кожи по физико-физиологическим и продукт-зависимым параметрам емкостным методом (Corneometer CM 825) Int J Cosmet Sci. 2003; 25: 45–53. [ PubMed ] [ Google ученый ] 10. Сух Д.Х., Квон Т.Е., Ким С.Д., Парк С.Б., Квон О.С., Ким К.Х. и др. Изменения трансэпидермальной потери воды (TEWL) в псориатических бляшках во время терапии D-PUVA. Ann Dermatol. 2001; 13: 7–11. [ Google ученый ] 11. Ма Т, Хара М, Суграт Р., Вербаватц Дж.М., Веркман А.С. Нарушение гидратации рогового слоя у мышей, лишенных эпидермального водного канала аквапорин-3. J Biol Chem. 2002; 277: 17147–17153. [ PubMed ] [ Google ученый ] 12. Хара М, Ма Т, Веркман А.С. Селективно сниженный уровень глицерина в коже мышей с дефицитом аквапорина-3 может быть причиной нарушения гидратации, эластичности и восстановления барьера кожи. J Biol Chem. 2002; 277: 46616–46621. [ PubMed ] [ Google ученый ] 13. Ли Дж, Тан Х, Ху Х, Чен М, Се Х. Экспрессия гена аквапорина-3 и белка в защищенной от солнца коже человека уменьшается с возрастом кожи. Australas J Dermatol. 2010; 51: 106–112. [ PubMed ] [ Google ученый ] 14. Хара-Чикума М, Веркман А.С. Аквапорин-3 действует как транспортер глицерина в коже млекопитающих. Биол Селл. 2005; 97: 479–486. [ PubMed ] [ Google ученый ] 15. Восс К.Е., Боллаг Р.Дж., Фусселл Н., Б.К., Шихан диджей, Боллаг В.Б. Аномальная экспрессия белка аквапорина-3 при гиперпролиферативных заболеваниях кожи. Arch Dermatol Res. 2011; 303: 591–600. [ PMC бесплатная статья ] [ PubMed ] [ Google ученый ] 16. Хори I, Маэда М, Йокояма С, Хисатсуне А, Кацуки Х, Мията Т и др. Фактор некроза опухоли-альфа снижает экспрессию аквапорина-3 в кератиноцитах DJM-1. Biochem Biophys Res Commun. 2009; 387: 564–568. [ PubMed ] [ Google ученый ] 17. Накахигаши К., Кабасима К., Икома А., Веркман А. С., Миячи Ю., Хара-Чикума М. Повышенная регуляция аквапорина-3 участвует в пролиферации кератиноцитов и гиперплазии эпидермиса. J Инвест Дерматол. 2011; 131: 865–873. [ PubMed ] [ Google ученый ] 18. Bellemère G, Von Stetten O, Oddos T. Ретиноевая кислота увеличивает экспрессию аквапорина 3 в нормальной коже человека. J Инвест Дерматол. 2008; 128: 542–548. [ PubMed ] [ Google ученый ] Статьи из Annals of Dermatology предоставлены здесь благодаря любезности Корейской дерматологической ассоциации и Корейского общества исследовательской дерматологии.

Похожие

Сео Джун Янг | Rambling R
... ишется Seo Jun Young )"> Вы знаете Suh Joon Young (также пишется Seo Jun Young )? Он родился в 1987 году в Корее, снимался в корейской версии « Хана Кими» (как « Ха Сын Ри» ) и в настоящее время транслирует кабельную драму « Безработный роман» (в роли адвоката Ван Ха ). Его дебютом была драма Sad Love Song для официального М.В. в 2005 году (его нашел
Сео Юнг-Вон
Сео Юнг-Вон Персоналия дня рождения
Методы построения ссылок
Последнее обновление: 29 марта 2019 г., 19:22 В последнее время я занимался сбором техник построения ссылок, чтобы поделиться ими со всеми читателями SEO Hacker. Это не совсем «волшебство», но это то, что вы можете сделать как уникальное задание против ваших конкурентов.
SEO анализ сайта
под редакцией Маттео д'Агостино Эксперт по интернет-маркетингу окончил факультет философии и гуманистической информатики в Университете Ка 'Фоскари
Сео Йе-дзи | subtitledreams
... личный сюжет. Я ожидал, что меня победят нон-стоп легким развлечением, случайной слезой, отличной бромансом и классными костюмами. Я не был разочарован. Авторы этого шоу, к счастью, обратили внимание на успехи и неудачи других ансамблевых шоу с участием большого количества людей и сумели не допустить подобных ошибок. Вместо этого они повторили тропы, которые мы любим (собравшиеся вместе чужие братья, лучшие друзья с проверенной верностью, сыновьям, которые должны противостоять тирании
Современные методы SEO
... ис позиционирования позволит вам получить лучшие результаты в первых местах поисковых систем благодаря нашей эффективной маркетинговой стратегии"> Наш веб-сервис позиционирования позволит вам получить лучшие результаты в первых местах поисковых систем благодаря нашей эффективной маркетинговой стратегии. Нормальные обратные ссылки »уже следуют по умолчанию, представьте себе, иначе было бы невозможно работать с ними, если бы каждый раз, когда мы помещали ссылку, нам приходилось идти в
Называется знакомство с Парк Мин Янг, Парк Сео Джун приносит имя Джастина Бибера
Называется знакомство с Парк Мин Янг, Парк Сео Джун приносит имя Джастина Бибера Встреча с Пак Мин Юнг,
SEO оценка. Платите только за результаты
... анализ конкурентов в секторе компании? Какой уровень сложности вы ожидаете, на уровне ключевых слов, которые будут использоваться? Вот первые вопросы, на которые нужно ответить, чтобы выбрать бюджет SEO, который наилучшим образом соответствует вашим потребностям. В конце концов, вы не можете убежать: как и во всех профессиях, чем дольше и сложнее ваша работа, тем больше вы ожидаете, что оценка SEO будет дорогой. Но действительно ли это правило настолько жесткое и универсальное?
Пак Сео Джун отвечает на распространение «доказательств» свиданий с Пак Мин Янг, вот факты
TRIBUNPEKANBARU.COM - Слухи о Парк Сео Хун и Парк Мин Янг знакомства появляются после конца Корейская драма Что не так с секретарем Ким успешно. Даже по слухам Пак Сео Джун и Парк Мин Янг упомянул, что
Ли Со-Джин - Блог Фаридиллы Айнун
... лируется на TVN, и есть некоторые, которые могут быть доступны онлайн-трансляции. Я иногда транслирую на Kshowonline. Ну, в этом году PD Na сделал еще одно захватывающее телешоу под названием Youn's Kitchen. Я не смотрел первый эпизод TVN с самого начала, но сразу «поймал» при съемке в Индонезии. В некоторых новостях это называется съемкой на
Стоят ли Squidoo и HubPages?
... ия Маккой в Партнерский маркетинг Статьи по маркетингу Запись / Содержание

Комментарии

Теперь поисковые системы видят, как люди взаимодействуют с вашим сайтом: возвращаются ли они и нажимают ли они на результаты, или они находят ответы, которые ищут, когда находятся на вашем сайте?
Теперь поисковые системы видят, как люди взаимодействуют с вашим сайтом: возвращаются ли они и нажимают ли они на результаты, или они находят ответы, которые ищут, когда находятся на вашем сайте? Сегодня речь идет об активности после клика. Вы должны не только получать клики, но и удовлетворять намерения пользователя ». 7. Размер также имеет значение Нил Патель утверждает, что средняя длина веб-страниц, которые входят в топ-10, приводит к любому ключевому слову в Google
Итак, если вы наняли универсалиста, ожидаете ли вы, что они поймут ваши ключевые слова и позволят ли они отклониться от того, что вы им даете?
Итак, если вы наняли универсалиста, ожидаете ли вы, что они поймут ваши ключевые слова и позволят ли они отклониться от того, что вы им даете? Джейкоб: Я бы не стал. Стейси: маркетолог = стратег с точки зрения бренда. SEO = стратег с точки зрения поиска. И писатель = рассказчик, который пишет для достижения корп. цели, используя руководство SEO для достижения этих целей? Вывод: ключевые слова Focus необходимы
» Помогает ли это им, обучает ли их или каким-то образом их привлекает?
» Помогает ли это им, обучает ли их или каким-то образом их привлекает? Новости: Google накажет сайты с большим количеством объявлений в верхней части страниц Иногда дублированный контент является частью того, что компания законно предлагает. Например, крупная издательская компания может публиковать одну и ту же статью на нескольких
Кажется ли, что эти изменения требуют много изменений?
Кажется ли, что эти изменения требуют много изменений? Технология может многое сделать для вас. Например, оптимизируйте взаимодействие с клиентом с помощью чат-бота, чтобы клиенты связывались с вашей компанией 24/7. Такие методы, как Виртуальная реальность и Дополненная реальность, также могут помочь определить, например, подходят ли предметы человеку или его дому. Многие из пожеланий легко организовать и поэтому могут предложить вам преимущества. Поставьте клиента в центр своего бизнеса, и
Будут ли изменения, которые вы хотите внести на сайт, иметь положительное или отрицательное влияние на пользователей?
Будут ли изменения, которые вы хотите внести на сайт, иметь положительное или отрицательное влияние на пользователей? Как аудит поможет вашему сайту? Реализация комментариев от SEO-аудита принесет много долгосрочных и краткосрочных преимуществ для вашего сайта и компании. Из аудита вы узнаете: Насколько сильна ваша конкуренция, Может ли ваш сайт достичь ваших интернет-целей, Какие ошибки у вас есть на вашем сайте и как их устранить,
Приведет ли это продолжение к исчезновению звезды Сео Ин-Гука?
Приведет ли это продолжение к исчезновению звезды Сео Ин-Гука? Трудно сказать, видя, как рынок развлечений, будь то кино или музыка, чрезвычайно изменчив, и его звезда может быстро расти и падать в зависимости от того, будет ли следующий проект звезды таким же популярным, как и предыдущий. Но Сео Ин-Гук, похоже, пока не виноват в слабости драмы, и ему повезло, что он играет второстепенную роль, так что у него больше возможностей отточить свой актерский талант, не получив при этом главный удар.
Готовы ли вы молодой выпускник сразу войти в мир труда?
Готовы ли вы молодой выпускник сразу войти в мир труда? Вы предприниматель, который хочет понять, как завоевать клиентов, или безработный, ищущий новую профессию? Вы ничего не знаете о поисковой оптимизации, и вы хотите понять, что это такое? ОСНОВНОЙ SEO-КУРС Вы уже посещали курс SEO во Флоренции и хотите углубить свои знания в этой области?
Часто ли пользователи нажимают на результаты поиска, вместо того, чтобы выбрать другой результат или выполнить повторный поиск?
Часто ли пользователи нажимают на результаты поиска, вместо того, чтобы выбрать другой результат или выполнить повторный поиск? Ключевые слова / название. Соответствуют ли ключевые слова из обозначений «ключевые слова» и «заголовок» в разметке приложения запросу пользователя? Агрегированное Обязательство. Сколько пользователей работает с экраном приложения? Структурированные данные в сети. Правильно ли реализованы
В эпизоде ​​16 персонаж Ли Сео Вона задал персонажу Кан Мин Хюк этот вопрос: «Насколько вам нравится Юн Чжэ?
В эпизоде ​​16 персонаж Ли Сео Вона задал персонажу Кан Мин Хюк этот вопрос: «Насколько вам нравится Юн Чжэ? Если она тебе нравится, будь осторожен. Я мог бы попытаться украсть ее у тебя. В последующих эпизодах химия Ха Джи Вона и Ли Сео
Использовали ли вы стратегии SEO, чтобы помочь привлечь больше пациентов с помощью онлайн-поиска?
Использовали ли вы стратегии SEO, чтобы помочь привлечь больше пациентов с помощью онлайн-поиска? Мы будем рады услышать ваши истории успеха! Вы можете использовать эти простые советы по SEO в исследовании и исполнении ключевых слов, чтобы усилить свое присутствие в Интернете. Немного поработав, вы сможете улучшить целевой рейтинг поиска и привлечь больше пациентов. Удачи! KC Backofen KC Backofen - менеджер по интернет-маркетингу
Находят ли поисковики на вашей странице то, что они ищут, или они возвращаются, чтобы щелкнуть другие результаты поиска?
Находят ли поисковики на вашей странице то, что они ищут, или они возвращаются, чтобы щелкнуть другие результаты поиска? Останутся ли поисковики на вашей странице, перейдут на другие страницы или отскочат всего за секунду или две? То, как пользователи взаимодействуют с вашим контентом, вероятно, повлияет на ваш рейтинг, поэтому Рэнд предлагает список вещей, на которые стоит обратить внимание: Контент, который удовлетворяет сознательные и бессознательные потребности искателя;

Ишется Seo Jun Young )"> Вы знаете Suh Joon Young (также пишется Seo Jun Young )?
Анализ конкурентов в секторе компании?
Какой уровень сложности вы ожидаете, на уровне ключевых слов, которые будут использоваться?
Но действительно ли это правило настолько жесткое и универсальное?
Теперь поисковые системы видят, как люди взаимодействуют с вашим сайтом: возвращаются ли они и нажимают ли они на результаты, или они находят ответы, которые ищут, когда находятся на вашем сайте?
Итак, если вы наняли универсалиста, ожидаете ли вы, что они поймут ваши ключевые слова и позволят ли они отклониться от того, что вы им даете?
Ели, используя руководство SEO для достижения этих целей?
» Помогает ли это им, обучает ли их или каким-то образом их привлекает?
Кажется ли, что эти изменения требуют много изменений?
Будут ли изменения, которые вы хотите внести на сайт, иметь положительное или отрицательное влияние на пользователей?

Наш магазин

Сезонные товары

Icon    Доставка в течение дня
Icon    Работаем с 09:00 до 18:00 кроме выходных
Icon    Возврат в течении 14 дней
Icon    Гарантия на все товары